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细菌总数的测定

原创版权 关键字:细菌总数的测定测试案例 相关: 发布时间: 2025-06-30 19:39:53

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因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

检测项目

培养条件设置:

  • 温度参数:37±0.5℃恒温(参照ISO 4833-1:2013)
  • 培养时间:24-48小时(时间允差±1小时)
  • 湿度控制:相对湿度≥90%
培养基制备:
  • 琼脂类型:平板计数琼脂(PCA)(pH 7.0±0.2,参照FDA BAM)
  • 灭菌参数:高压灭菌121℃维持15分钟
  • 冷却温度:45-50℃倾注温度阈值
样品处理:
  • 稀释倍数:10倍系列稀释(10-1至10-6梯度)
  • 均质方法:旋涡振荡时间30秒(振幅≥5mm)
  • 静置时间:混合后≤10分钟处理延迟
计数规则:
  • 菌落范围:有效计数区30-300个菌落(参照GB 4789.2)
  • 计算方法:菌落形成单位(CFU/mL或/g)公式
  • 重复性要求:平行样品偏差≤10%
质量控制参数:
  • 空白对照:无菌平板无生长
  • 阳性对照:标准菌株回收率≥70%
  • 环境监测:培养箱温度波动≤±0.5℃
结果报告标准:
  • 数据格式:CFU值±标准差(保留两位小数)
  • 检出限设定:最低检出限≤1 CFU/mL
  • 报告阈值:超标值提示(如>100 CFU/g)
样品保存条件:
  • 保存温度:冷藏4±2℃(保存时限≤24小时)
  • 冷冻要求:-20℃长期保存(参照ISO 7218)
  • 转运时间:现场处理≤2小时
微生物安全控制:
  • 生物安全级别:BSL-2实验室要求(无菌操作规范)
  • 消毒剂浓度:70%乙醇擦拭频次(每小时一次)
  • 废物处理:高压灭菌后处置
培养基验证:
  • 生长率测试:大肠杆菌ATCC 25922回收率≥80%
  • 选择性检测:非目标菌抑制率≥90%
  • pH稳定性:存储期pH变化≤0.1单位
仪器校准:
  • 天平精度:±0.001g(校准周期半年)
  • 移液器误差:≤±1%体积偏差(参照ISO 8655)
  • 温度计校准:±0.1℃精确度

检测范围

1. 饮用水: 涵盖自来水及瓶装水,重点检测总细菌数限值≤100 CFU/mL以评估管道污染风险。

2. 乳制品: 包括鲜奶及酸奶,检测重点为冷藏样品中嗜冷菌计数≤1000 CFU/g以监控腐败变质。

3. 肉制品: 涉及生鲜肉及加工肉,侧重腐败菌如假单胞菌计数超标阈值>104 CFU/g。

4. 化妆品: 覆盖护肤品及彩妆,重点检测微生物限量≤100 CFU/g或mL以预防皮肤感染。

5. 药品: 包括口服液及注射液,检测无菌制剂中总菌数不得检出目标。

6. 空气样本: 涉及室内及工业环境,重点检测沉降菌≤100 CFU/m³以评估空气质量。

7. 表面样本: 涵盖医疗器械及食品接触面,检测重点为卫生指标菌如大肠菌群关联计数。

8. 土壤样本: 包括农田及污染土,侧重指示菌如芽孢杆菌计数以评估生物活性。

9. 废水: 涉及生活及工业废水,检测细菌总数超标值>105 CFU/mL以监控处理效率。

10. 饲料: 包括动物饲料及添加剂,重点检测霉菌和细菌总数≤1000 CFU/g以确保安全储存。

检测方法

国际标准:

  • ISO 4833-1:2013 食品和饲料中微生物计数方法(倾注平板法,培养温度37℃)
  • ISO 6222:1999 水质中可培养微生物计数(膜过滤法,计数范围修正)
  • ISO 7218:2007 微生物学通用指南(样品稀释差异说明)
国家标准:
  • GB 4789.2-2016 食品安全国家标准 菌落总数测定(培养时间48小时优先)
  • GB/T 5750.12-2006 生活饮用水标准检验方法(膜过滤法替代倾注,温度范围差异)
  • GB 15979-2002 一次性卫生用品微生物检验(计数规则阈值差异)
差异说明:国际标准ISO 4833采用37℃单一温度,而GB 4789.2允许30℃扩展培养;计数方法上ISO 6222偏好膜过滤,GB标准则兼容倾注法;样品稀释梯度ISO要求10倍序列,GB允许5倍调整;培养时间ISO设定24小时基准,GB优先48小时以覆盖慢生长菌;培养基选择ISO指定PCA,GB可扩展至营养琼脂。

检测设备

1. 恒温培养箱: MMM Groupcell 240型(温度范围20-60℃,精度±0.1℃)

2. 高压灭菌器: Systec VE-150型(压力范围0-3 bar,灭菌时间可调)

3. 菌落计数器: Scan 500自动计数仪(分辨率0.1mm,计数速度≤5秒/平板)

4. 生物安全柜: Baker SG403A型(气流速度0.5m/s,HEPA过滤效率99.99%)

5. 电子天平: Sartorius CPA225D型(量程0-220g,精度±0.001g)

6. 移液器: Eppendorf Research Plus型(体积范围0.1-1000μL,误差±0.5%)

7. pH计: Mettler Toledo SevenCompact型(测量范围0-14,精度±0.01)

8. 旋涡混合器: IKA MS3 digital型(转速100-3000 rpm,时间控制1-60秒)

9. 恒温水浴锅: Julabo SW23型(温度范围5-99℃,稳定性±0.05℃)

10. 显微镜: Olympus CX43型(放大倍数40-1000X,LED光源强度可调)

11. 膜过滤装置: Millipore Stericup型(滤膜孔径0.45μm,流量控制0.1L/min)

12. 稀释瓶系统: Nalgene系列型(容量范围50-1000mL,无菌密封设计)

13. 温度记录仪: Testo 175-H1型(数据存储≥10000点,精度±0.2℃)

14. 振荡培养箱: New Brunswick Innova 42型(振荡频率50-300 rpm,振幅可调)

15. 计时器: Trumeter 6310型(精度±0.01秒,多通道控制)

北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

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