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CAR-T细胞治疗副作用预测模型

原创版权 关键字:CAR-T细胞治疗副作用预测模型,第三方检测机构,中析研究所 相关: 发布时间: 2025-07-31 14:39:07

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因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

检测项目

细胞活力检测:

  • 活细胞比例:存活率(≥95%)
  • 凋亡分析:早期凋亡细胞比例(参照ISO10993-5)
  • 坏死率:PI阳性细胞占比(≤5%)
细胞因子分析:
  • IL-6释放水平:浓度(pg/mL,阈值≤1000)
  • IFN-γ监测:动态变化曲线
  • TNF-α峰值:时间点浓度(参照ISO17025)
免疫表型检测:
  • CD3+T细胞比例:绝对值计数(%)
  • CAR表达率:阳性细胞占比(≥80%)
  • 记忆T细胞亚群:中央记忆型比例(%)
基因表达谱:
  • CAR转导效率:载体拷贝数(拷贝/细胞)
  • 炎症因子基因:mRNA表达水平(foldchange)
  • 调控基因:FOXP3表达量
毒性评估:
  • CRS风险评分:综合指数(0-10)
  • 神经毒性指数:分级标准(参照CTCAEv5)
  • 免疫相关不良事件:发生率(%)
功能性检测:
  • 靶细胞杀伤效率:裂解率(≥70%)
  • 抗原特异性激活:CD69表达升高倍数
  • 增殖能力:CFSE稀释指数
代谢参数:
  • 葡萄糖消耗率:mmol/L/h
  • 乳酸产生量:峰值浓度(mmol/L)
  • 耗氧率:OCR值(pmol/min)
稳定性测试:
  • 储存稳定性:活力保持率(≥90%at-196°C)
  • 冻融复苏率:功能恢复指数(≥85%)
  • 货架期监测:时间点降解率
杂质检测:
  • 内毒素水平:EU/mL(≤0.5)
  • 残留DNA:ng/dose(≤10)
  • 支原体污染:阴性确认
生物标志物预测:
  • 基线免疫状态:淋巴细胞绝对值(cells/μL)
  • 血清标志物:C反应蛋白浓度(mg/L)
  • 遗传风险因子:SNP分析

检测范围

1.CAR-T细胞制剂:自体或异体制备产品,重点检测细胞活性、CAR表达纯度和残留杂质水平。

2.患者外周血样本:治疗前基线样本,侧重免疫表型特征和基线细胞因子预测副作用敏感性。

3.细胞培养上清液:体外培养介质,监测细胞因子动态释放评估CRS风险。

4.组织活检样本:神经组织或肿瘤样本,检测炎症浸润和神经毒性相关标志物。

5.基因编辑中间体:质粒或病毒载体,侧重纯度、转导效率和安全性参数。

6.最终产品释放样本:GMP标准下制品,确保细胞活力、功能性和无菌性符合治疗要求。

7.临床存档样本:长期存储血液或组织,用于生物标志物回溯性分析和模型验证。

8.动物模型样本:临床前研究用样本,侧重副作用模拟和预测模型校准。

9.质量控制参考样本:标准品或模拟样本,验证检测准确性和重现性。

10.冻存复苏细胞:解冻后制品,评估复苏率、功能完整性和稳定性影响。

检测方法

国际标准:

  • ISO10993-5体外细胞毒性试验方法
  • ISO17025检测和校准实验室能力要求
  • ISO15189医学实验室质量和能力要求
  • ISO20391-1细胞计数标准指南
  • ISO23162流式细胞术操作规范
国家标准:
  • GB/T37864生物样本库质量管理规范
  • GB/T39760细胞治疗产品质量控制
  • GB/T20469临床实验室质量管理要求
  • GB/T35523基因检测技术规范
  • GB/T34796体外诊断试剂稳定性评价
(差异说明:ISO标准侧重国际通用灵敏度,GB标准强化本地化验证要求,例如在细胞因子检测中ISO使用pg/mL单位而GB强调ng/mL转换标准)

检测设备

1.流式细胞仪:BDFACSAriaIII型(检测灵敏度1000细胞/秒)

2.实时荧光定量PCR仪:ABIQuantStudio7型(检测限0.01拷贝/µL)

3.酶联免疫吸附分析仪:BioTekSynergyH1型(波长范围200-999nm)

4.细胞计数器:InvitrogenCountessIIFL型(精度±5%)

5.生物分析仪:AgilentBioanalyzer2100型(分辨率1-50,000bp)

6.超低温冰箱:ThermoScientificTSX系列(温度-86°C)

7.离心机:Eppendorf5427R型(转速至30,000rpm)

8.显微镜:OlympusIX83型(放大倍数40x-1000x)

9.生物安全柜:NuAireClassII型(HEPA过滤效率99.99%)

10.CO2培养箱:ThermoForma系列(CO2控制精度±0.1%)

11.分光光度计:NanodropOne型(样品体积1µL)

12.液相色谱仪:WatersACQUITYUPLC型(流速0.01-2mL/min)

13.质谱仪:SCIEXTripleQuad6500+型(质量精度1ppm)

14.自动化工作站:HamiltonMicrolabSTAR型(移液精度0.1µL)

15.细胞培养监测系统:SartoriusIncucyteS3型(实时成像频率1frame/min)

北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

本文链接:https://www.yjser.com/huanjingjiance/24253.html

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