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HHV-7DNA定量测试

原创版权 关键字:HHV-7DNA定量测试,第三方检测机构,中析研究所 相关: 发布时间: 2025-07-30 17:20:04

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因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

检测项目

DNA提取:

  • 提取效率:回收率≥95%(参照ISO21571)
  • 纯度检测:A260/A280比值1.8-2.0,A260/A230比值≥2.0
DNA定量:
  • 浓度测定:检测范围0.1-1000ng/μL(精度±5%)
  • 完整性评估:片段长度≥500bp(电泳法参照GB/T37869)
PCR扩增:
  • 扩增效率:斜率值-3.0至-3.5(R²≥0.99)
  • 循环阈值:Ct值检测限10拷贝/μL(参照ISO17822)
特异性检测:
  • 交叉反应性:无HHV-6/HHV-8干扰(验证方法GB/T19495.2)
  • 引物特异性:熔解曲线单峰(Tm值±0.5°C)
灵敏度检测:
  • 检测下限:LOD≤5拷贝/反应(参照ISO22174)
  • 线性范围:10-10⁶拷贝/μL(R²≥0.98)
质量控制:
  • 内标基因:β-actinCt值20-25(偏差±1.0)
  • 重复性验证:CV≤5%(n=3)
样本稳定性:
  • 储存条件:-80°C保存期≥6个月(降解率≤10%)
  • 冻融耐受:≤3次循环(Ct值变化±0.5)
交叉污染控制:
  • 阴性对照:无扩增信号(参照GB/T37869)
  • 环境监控:气溶胶检测阴性
数据解析:
  • 定量算法:ΔΔCt法(误差±0.2)
  • 报告阈值:病毒载量≥50拷贝/mL(临床判定)
报告生成:
  • 格式规范:符合ISO15189要求
  • 数据完整性:元数据记录率100%

检测范围

1.全血样本:EDTA抗凝处理,重点检测免疫抑制患者病毒载量动态变化

2.血清样本:离心分离血清,侧重高脂血干扰下的DNA回收率优化

3.血浆样本:肝素抗凝,核心检测凝血因子对qPCR抑制效应

4.唾液样本:非侵入性采集,关注口腔微生物DNA交叉污染控制

5.尿液样本:离心浓缩处理,重点评估低浓度DNA扩增效率

6.组织活检样本:福尔马林固定石蜡包埋,侧重DNA片段化修复技术

7.细胞培养上清:病毒培养液,核心检测细胞残留DNA背景干扰

8.干血斑样本:滤纸干燥保存,重点验证长期储存DNA稳定性

9.脑脊液样本:无菌采集,侧重低体积样本浓缩方法

10.拭子样本:咽喉或鼻腔拭子,核心检测采样棉纤维抑制物去除

检测方法

国际标准:

  • ISO17822:2019分子体外诊断试验—病毒DNA定量检测性能要求
  • ISO22174:2005食物链微生物学—聚合酶链反应检测病原体方法
  • ISO15189:2022医学实验室—质量和能力要求
国家标准:
  • GB/T19495.2-2004转基因产品检测核酸定量PCR方法
  • GB/T37869-2019核酸检测用试剂盒质量评价技术规范
  • GB/T35823-2018临床分子诊断试剂盒技术要求
国际标准强调扩增引物设计和验证流程,而国家标准侧重样本前处理规范和数据报告格式,例如GB标准要求冻融循环耐受测试更严格。

检测设备

1.核酸提取仪:MagCoreHF16型(通量96样本/次,磁珠回收率≥98%)

2.实时荧光定量PCR仪:7500型(检测通道5个,温度精度±0.1°C)

3.分光光度计:NanoDropOne型(波长范围190-840nm,检测限0.2ng/μL)

4.高速离心机:AllegraX-15R型(最大转速15000rpm,容量6×50mL)

5.恒温混匀器:ThermoMixerC型(温度范围4-99°C,振荡频率300-1500rpm)

6.生物安全柜:ClassIIA2型(气流速度0.5m/s,HEPA过滤效率99.99%)

7.超低温冰箱:-80°C型(温度稳定性±3°C,容量700L)

8.微量移液器:单道移液器(量程0.1-1000μL,精度±1%)

9.PCR板封膜机:自动封膜仪(密封压力10-15psi,兼容96孔板)

10.电泳系统:凝胶成像仪(分辨率5M像素,紫外透射波长302nm)

11.恒温培养箱:37°C型(温度均匀性±0.5°C,容量150L)

12.水浴锅:数字控制型(温度范围20-100°C,精度±0.1°C)

13.数据分析软件:qPCR分析软件(兼容ΔΔCt算法,数据导出格式CSV)

14.样本存储系统:自动化样本库(条形码识别率100%,存储温度-20°C至-80°C)

15.气溶胶检测仪:实时监控仪(灵敏度0.3μm颗粒,报警阈值≥5颗粒/L)

北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

本文链接:https://www.yjser.com/huanjingjiance/24064.html

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