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心肌组织ATP含量检测

原创版权 关键字:心肌组织ATP含量检测,第三方检测机构,中析研究所 相关: 发布时间: 2025-07-25 13:45:47

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因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

检测项目

能量代谢指标:

  • ATP含量:绝对值(μmol/gwetweight)、组织浓度(nmol/mgprot)
  • 能荷状态:能荷值EC=[ATP+0.5ADP]/TAN(参照Atkinson公式)
  • 磷酸化合物比值:ATP/ADP≥10、PCr/ATP(正常范围1.8-2.2)
腺苷酸池分析:
  • 腺苷酸总量:TAN=ATP+ADP+AMP(检测限0.05μmol/g)
  • 代谢产物:IMP生成量(≤0.02μmol/g)、腺苷释放量(HPLC法)
氧化磷酸化参数:
  • 线粒体呼吸控制率:RCR≥4(参照Chance法)
  • P/O比值:NADH途径≥2.5、FADH2途径≥1.5
酶活性关联指标:
  • 肌酸激酶活性:CK(U/mgprot)±5%偏差
  • 腺苷酸激酶:AK1同工酶活性(nmol/min/mg)
组织损伤标志物:
  • 乳酸脱氢酶泄漏量:LDH(U/L组织匀浆)
  • 心肌钙蛋白I:cTnI交叉验证(ELISA法)
代谢流分析:
  • 13C-葡萄糖示踪:ATP合成速率(nmol/min/g)
  • 氧消耗率:OCR(pmol/min/μgprot)
离子通道功能:
  • Na+/K+-ATP酶活性:水解率(μmolPi/h/mg)
  • 钙瞬变幅度:Δ[Ca2+](nM/ms)
抗氧化能力:
  • 谷胱甘肽还原酶:GR(U/mgprot)
  • 过氧化氢酶活性:CAT(k/mg)
膜完整性检测:
  • 丙二醛含量:MDA(nmol/mgprot)
  • 膜电位变化:ΔΨm(JC-1荧光法)
基因表达验证:
  • ATP合酶亚基:ATP5A1表达量(qPCRCt值±0.5)
  • 解耦联蛋白:UCP2/3mRNA拷贝数

检测范围

1.动物模型心肌:啮齿类/犬类/灵长类心脏组织,重点检测缺血再灌注损伤后ATP恢复率

2.临床活检心肌:心内膜心肌活检(EMB)样本,需满足≥5mg湿重,侧重线粒体功能异常诊断

3.离体灌流心脏:Langendorff模型,监测电刺激下ATP动态消耗速率

4.心肌细胞培养物:原代/干细胞分化心肌细胞,评估培养体系能量代谢效率

5.冷冻保存组织:液氮速冻(<-150℃)样本,验证储存期ATP稳定性(≤72h)

6.病理切片样本:石蜡包埋组织,需进行脱蜡处理检测ATP酶活性定位

7.心肌线粒体分离物:差速离心法制备线粒体,检测呼吸链复合体Ⅴ活性

8.心衰模型组织:扩张型/肥厚型心肌病样本,分析ATP合成储备能力

9.药物干预研究:强心苷/β阻滞剂处理组,监测PCr/ATP比值变化敏感度

10.基因编辑心肌:CRISPR-Cas9修饰样本,验证ATP相关基因敲除效率

检测方法

国际标准:

  • ISO15197:2013体外诊断检测系统要求
  • NIHPublication08-6436心肌代谢物提取规范
  • AHAScientificStatement2016心肌能量代谢评估指南
国家标准:
  • GB/T37869-2019生物样品中三磷酸腺苷检测方法
  • WS/T420-2013临床生物化学检验操作规程
  • YY/T1678-2019肌酸激酶同工酶检测试剂盒
方法差异说明:HPLC-MS/MS法较传统荧光法灵敏度提升100倍;国标要求匀浆液离心力≥10,000×g与国际标准12,000×g存在系统误差校正

检测设备

1.超高效液相色谱仪:WatersACQUITYUPLCH-Class(保留时间偏差≤0.05min)

2.三重四极杆质谱仪:SCIEXQTRAP6500+(质量精度±0.01Da)

3.组织匀浆系统:PrecellysEvolution(转速200-10000rpm,温控±0.5℃)

4.冷冻离心机:ThermoScientificSorvallLYNX6000(最大离心力100,000×g)

5.荧光分光光度计:HitachiF-7100(激发/发射波长精度±1nm)

6.高通量酶标仪:BioTekSynergyH1(检测动态范围0.001-4.0OD)

7.线粒体耗氧仪:AgilentSeahorseXFe96(分辨率0.1pmol/min)

8.电化学工作站:CHI760E(电位扫描速率0.001-1000V/s)

9.实时荧光定量PCR仪:RocheLightCycler480(温度均一性±0.1℃)

10.激光共聚焦显微镜:ZeissLSM980(空间分辨率120nm)

11.全自动化学发光仪:SiemensADVIACentaurXP(检测限0.02ng/mL)

12.液氮冷冻研磨仪:SPEXSamplePrep6970EFM(冷却速率-20℃/s)

13.超微量分光光度计:NanoDropOne(样品体积0.5μL)

14.电生理记录系统:MolecularDevicesAxonAxopatch200B(采样率500kHz)

15.生物能流分析仪:OroborosO2k(氧传感器精度±0.1nM)

北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

本文链接:https://www.yjser.com/huanjingjiance/23672.html

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