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沙门氏菌测试

原创版权 关键字:沙门氏菌测试,第三方检测机构,中析研究所 相关: 发布时间: 2025-07-12 08:58:51

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因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

检测项目

初筛检测:

  • 增菌培养:培养时间24-48小时、温度37±1°C(参照ISO 6579)
  • 选择性分离:使用XLD琼脂、SS琼脂(显色反应阳性)
  • 快速筛查:免疫层析法、检测限100 CFU/mL(参照AOAC 2003.09)
生化确认:
  • 乳糖发酵测试:阴性反应、产气量≤0.5mL(参照FDA BAM)
  • H2S产生测试:阳性反应、黑色沉淀形成(灵敏度≥90%)
  • 尿素酶测试:阴性反应、pH变化监测
血清学鉴定:
  • O抗原检测:凝集反应阳性、滴度≥1:80(参照WHO指南)
  • H抗原检测:鞭毛抗原特异性、血清型匹配度
  • Vi抗原测试:阳性率≥95%(用于伤寒沙门氏菌)
分子检测:
  • PCR扩增:引物特异性invA基因、循环数35-40(参照ISO/TS 6579-2)
  • 实时荧光PCR:Ct值≤30、检测限10 CFU/mL
  • 基因测序:16S rRNA匹配度≥99%(参照CLSI MM18)
定量分析:
  • MPN法:稀释系列1:10、置信区间95%(参照ISO 7218)
  • 菌落计数:CFU/mL计算、误差±5%
  • 生物膜定量:OD600值≥0.2(参照ASTM E2647)
药敏测试:
  • 抗生素敏感性:MIC值测定、范围0.25-256 μg/mL(参照CLSI M100)
  • 耐药基因检测:blaTEM基因阳性(PCR确认)
  • 抑菌圈直径:≥15mm(氨苄西林)
环境监测:
  • 表面擦拭测试:采样面积10cm²、回收率≥80%
  • 空气采样:撞击法流量28.3L/min、检测限1 CFU/m³
  • 水质检测:总大肠菌群≤100 MPN/100mL(参照EPA 1600)
快速检测:
  • 酶联免疫吸附:OD450值≥0.5、反应时间<30min
  • 生物传感器:响应时间<5min、灵敏度100 CFU/g
  • 显色培养基:显色反应阳性、特异性≥98%
质谱分析:
  • MALDI-TOF MS:谱库匹配度≥2.0、质量范围2000-20000 Da
  • 蛋白质指纹:峰强度≥5000(参照ISO/TS 17822)
  • 代谢物检测:短链脂肪酸浓度≥1mM
生物安全评估:
  • 毒力因子检测:sopB基因阳性(PCR确认)
  • 生物负载测试:CFU/g≤100(参照ISO 18593)
  • 热致死曲线:D值≥1min(温度72°C)

检测范围

1. 肉类样本: 涵盖生禽肉、牛肉等,检测重点在屠宰后表面污染和冷链储存残留沙门氏菌

2. 蛋类产品: 包括鲜蛋和蛋制品,检测重点在蛋壳渗透污染和沙门氏菌肠炎血清型

3. 乳制品: 如牛奶、奶酪等,检测重点在巴氏消毒后残留沙门氏菌和生物膜形成

4. 水样: 包括饮用水和废水,检测重点在总大肠菌群协同分析和沙门氏菌定量MPN法

5. 即食食品: 如沙拉、三明治等,检测重点在快速筛查和交叉污染风险评估

6. 环境表面: 如食品加工设备、工作台,检测重点在卫生监测和擦拭采样回收率

7. 农产品: 如蔬菜、水果等,检测重点在灌溉水污染和沙门氏菌附着检测

8. 海鲜样本: 包括生鱼和贝类,检测重点在冷链储存中沙门氏菌增殖和毒素产生

9. 临床样本: 如粪便、血液等,检测重点在病原体鉴定和耐药性分析

10. 动物饲料: 包括谷物和混合饲料,检测重点在污染源追踪和沙门氏菌定量限值

检测方法

国际标准:

  • ISO 6579-1:2017 食品和饲料中沙门氏菌检测(使用缓冲蛋白胨水增菌)
  • FDA BAM Chapter 5 沙门氏菌检测方法(强调乳糖发酵测试)
  • AOAC 2003.09 快速免疫检测法(基于酶联免疫吸附)
  • ISO/TS 6579-2:2012 分子检测方法(PCR引物特异性要求)
  • EPA 1600 水质沙门氏菌检测(MPN法应用)
国家标准:
  • GB 4789.4-2016 食品微生物学检验沙门氏菌检验(使用SS琼脂分离)
  • GB/T 5750.12-2006 生活饮用水标准检验方法(总大肠菌群协同分析)
  • GB 4789.28-2013 培养基和试剂质量要求(pH值控制6.8-7.2)
  • GB/T 4789.30-2016 食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验(交叉方法差异)
  • GB/T 27405-2008 实验室质量控制规范(误差控制±5%)
方法差异说明:国际标准ISO 6579采用缓冲蛋白胨水增菌,而国标GB 4789.4使用乳糖肉汤;ISO方法规定培养温度37±0.5°C,GB标准允许±1°C范围;分子检测中ISO/TS 6579-2要求引物特异性invA基因,GB标准未指定基因位点

检测设备

1. 恒温培养箱: Thermo Scientific Heratherm 型(温度范围25-45°C,精度±0.5°C)

2. PCR仪: Bio-Rad CFX96 型(检测限10 CFU/mL,循环数35-40)

3. 酶标仪: Thermo Multiskan FC 型(波长范围450-650nm,精度±1%)

4. 生物安全柜: Esco Airstream 型(风速0.5m/s,HEPA过滤效率99.99%)

5. 离心机: Eppendorf 5430R 型(转速100-15000rpm,容量50mL)

6. 显微镜: Olympus CX43 型(放大倍数400-1000x,分辨率0.2μm)

7. 自动菌落计数器: Synbiosis ProtoCOL 3 型(计数范围1-1000 CFU,误差±2%)

8. MALDI-TOF质谱仪: Bruker Microflex 型(质量范围2000-20000 Da,匹配度≥2.0)

9. 分光光度计: Shimadzu UV-1800 型(波长范围190-1100nm,精度±0.1nm)

10. 电泳仪: Bio-Rad PowerPac Basic 型(电压50-300V,电流10-400mA)

11. 振荡培养箱: New Brunswick Innova 44 型(转速50-300rpm,温度控制±1°C)

12. 水浴锅: Memmert WNB 型(温度范围20-100°C,精度±0.1°C)

13. 移液器: Eppendorf Research Plus 型(量程0.1-1000μL,误差±0.5%)

14. 冰箱: Haier DW-40L198 型(温度范围-20至10°C,稳定性±1°C)

15. 快速检测试剂盒: Neogen Reveal 型(检测限100 CFU/g,反应时间<30min)

北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

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