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胶原蛋白特征分析

原创版权 关键字:胶原蛋白特征分析测试周期,胶原蛋白特征分析测试案例,胶原蛋白特征分析测试仪器 相关: 发布时间: 2025-06-16 13:31:40

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因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

检测项目

结构特性检测:

  • 肽链构型分析:α/β/γ链比例(SEC-MALS联用)、三股螺旋含量(CD光谱220nm处椭圆率≥35mdeg)
  • 分子量分布:SDS-PAGE电泳条带分析(参照ISO17025:2017)、重均分子量(Mw≤300kDa)
理化纯度检测:
  • 特征氨基酸:羟脯氨酸含量(≥10%,GB/T35886-2018)、脯氨酸/羟脯氨酸摩尔比(1.0-1.6)
  • 杂质残留:重金属总量(Pb+Cd+As≤10ppm,ISO17294-2:2016)
热力学性能:
  • 变性温度:DSC检测熔融焓(ΔH≥40J/g,升温速率5℃/min)
  • 热收缩温度:水浴法测定Ts(≥60℃,ISO3387:2020)
生物学功能:
  • 酶解敏感性:胶原酶消化率(37℃/h失重≤15%,参照GB4789.35-2016)
  • 细胞相容性:L929细胞增殖率(≥对照组90%,ISO10993-5:2009)
溶液行为:
  • 粘度特性:旋转流变仪检测零剪切粘度(1%溶液η0≥50mPa·s)
  • 等电点测定:Zeta电位分析仪(pH6.8-7.4)
交联度分析:
  • 戊二醛残留:HPLC-MS/MS检测(≤50ppb,ISO13937-4:2018)
  • 共价键定量:TNBS法测定游离氨基减少率(≥30%)
光谱学表征:
  • 红外特征峰:FTIR检测酰胺I带(1650cm⁻¹±5cm⁻¹)、酰胺III带(1235cm⁻¹±10cm⁻¹)
  • 荧光光谱:色氨酸荧光强度比(I₃₅₀/I₃₃₀≤1.5)
微观形貌:
  • 原纤维直径:TEM观测(67nm±5nmD-period)
  • 表面拓扑:AFM粗糙度Ra(≤50nm,5μm×5μm扫描)
吸水性:
  • 溶胀比:PBS浸泡24h膨胀率(400%-600%)
  • 持水力:离心法测定(≥98%,3000rpm/10min)
机械性能:
  • 拉伸强度:万能材料机测试(湿态≥1.2MPa,ASTMD638-22)
  • 压缩模量:圆柱样品变形率(10%应变应力≥0.15MPa)

检测范围

1.动物源性胶原:牛跟腱/猪皮提取物,重点检测种属特异性肽段及病毒灭活残留

2.重组人源胶原:毕赤酵母/CHO细胞表达体系,核心验证C端肽序列正确性及糖基化水平

3.医用胶原敷料:交联型海绵/膜材,主控内毒素限值(≤0.5EU/mg)与降解周期(14-28天)

4.注射用填充剂:交联透明质酸-胶原复合物,专项检测颗粒均一度(D90≤80μm)及流变学性能

5.食品级明胶:酸法/碱法工艺产物,重点监控铬残留(≤2ppm)及凝胶强度(≥200Bloom)

6.组织工程支架:3D打印多孔结构,特征检测孔径分布(100-300μm)及连通孔隙率(≥90%)

7.化妆品原料:水解胶原肽,关键指标分子量(1-10kDa占比≥80%)及透皮吸收率

8.骨科修复材料:纳米羟基磷灰石-胶原复合材料,核心测试钙磷摩尔比(1.67±0.03)及体外矿化速率

9.角膜替代物:脱细胞鱼鳞胶原膜,专项检测透光率(≥90%,550nm)及曲率稳定性(ΔR≤0.5mm)

10.止血纤维:氧化再生纤维素-胶原复合物,主控凝血时间(≤60s)及体内吸收率(30天≥70%)

检测方法

国际标准:

  • ISO9665:2020明胶中羟脯氨酸测定反相HPLC法
  • ASTMF2450-18胶原支架材料体外降解试验规程
  • EP10.02.5.33医用胶原蛋白内毒素检测动态显色法
  • ISO10993-12:2021医疗器械样品制备与参照材料
国家标准:
  • GB/T38168-2019胶原蛋白特征氨基酸检测方法
  • YY/T1561-2017组织工程医疗产品胶原蛋白类材料表征
  • GB31645-2018食品安全标准胶原蛋白肽
  • YY/T1888-2023重组人源化胶原蛋白凝胶剂物理性能测试
国际HPLC方法采用C18色谱柱(5μm),国标GB/T38168指定氨基柱分离;ASTM降解试验使用PBS+胶原酶溶液,YY/T1561要求含溶菌酶的模拟体液;EP内毒素检测灵敏度0.005EU/mL,高于国标0.015EU/mL限值要求。

检测设备

1.圆二色谱仪:J-1500型(波长范围185-800nm,温控精度±0.1℃)

2.尺寸排阻色谱系统:WatersACQUITYAPC系统(分离范围2kDa-1MDa,示差折光检测器)

3.差示扫描量热仪:TAQ2000型(温度范围-90℃~550℃,热流精度0.1μW)

4.电感耦合等离子体质谱仪:NexION2000B型(检出限Pb0.01ppb,碰撞反应池技术)

5.激光粒度分析仪:Mastersizer3000型(测量范围0.01-3500μm,湿法分散模块)

6.旋转流变仪:MCR302型(扭矩范围0.05μNm-200mNm,温控±0.01℃)

7.冷冻透射电镜:TalosF200X型(加速电压200kV,冷冻样品台-180℃)

8.原子力显微镜:DimensionIcon型(扫描范围90μm×90μm,分辨率0.2nm)

9.全自动氨基酸分析仪:S433D型(分离柱温控130℃,茚三酮衍生检测)

10.凝胶成像系统:ChemiDocMP型(1600万像素CCD,荧光检测通道)

11.细胞培养实时监测系统:xCELLigenceRTCADP型(阻抗检测频率10kHz-1MHz)

12.万能材料试验机:5944型(载荷范围0.001N-2kN,应变速率0.001-1000mm/min)

13.傅里叶变换红外光谱仪:NicoletiS50型(光谱分辨率0.09cm⁻¹,ATR附件)

14.荧光分光光度计:FL6500型(激发波长200-900nm,PMT检测器)

15.超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪:1290-6470型(质量范围5-3000m/z,扫描速度50Hz)

北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

本文链接:https://www.yjser.com/huanjingjiance/21652.html

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