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蛋白类检测

原创版权 关键字:蛋白类测试标准,蛋白类项目报价,蛋白类测试范围 相关: 发布时间: 2025-06-12 17:17:31

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因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

检测项目

定量分析:

  • 蛋白质浓度:检测限0.1μg/mL(参照BCA法标准)
  • 总蛋白含量:偏差值±0.5%(凯氏定氮法依据ISO20483)
  • 溶解性:溶解度≥95%(紫外分光光度法)
纯度评估:
  • 杂质含量:≤5%(SDS-PAGE方法)
  • 内毒素水平:<0.1EU/mg(LAL法依据美国药典)
  • 聚集状态:多聚体比例<3%(尺寸排阻色谱)
结构表征:
  • 二级结构:α-螺旋百分比±2%(圆二色光谱法)
  • 分子量:精度±0.01kDa(质谱法参照ISO5725)
  • 折叠稳定性:Tm值偏差±0.5°C(差示扫描量热法)
功能活性:
  • 酶活性:比活力≥50U/mg(底物特异性测试)
  • 结合亲和力:KD值≤10nM(表面等离子共振法)
  • 生物安全性:细胞毒性IC50>100μM(MTT法)
免疫分析:
  • ELISA检测:灵敏度0.01ng/mL(酶联免疫法)
  • Westernblot:条带特异性≥95%(电泳转移法)
  • 抗原抗体结合:效价≥1:10000(免疫扩散法)
氨基酸分析:
  • 氨基酸组成:摩尔百分比误差±0.1%(离子交换色谱)
  • 序列覆盖率:≥98%(质谱测序法)
  • 末端分析:N端/C端一致性(Edman降解法)
修饰检测:
  • 磷酸化位点:数量偏差±1(质谱磷酸酶处理)
  • 糖基化模式:N-糖型分布百分比(凝集素芯片法)
  • 乙酰化水平:修饰度≥90%(高效液相色谱)
稳定性测试:
  • 热稳定性:降解率<5%/小时(加速老化法)
  • pH稳定性:活性保留≥80%(缓冲液滴定法)
  • 氧化稳定性:羰基含量<2nmol/mg(DNPH衍生法)
生物活性验证:
  • 受体结合:EC50值≤10nM(细胞荧光法)
  • 催化效率:kcat/Km≥1000M⁻¹s⁻¹(动力学分析)
  • 抑制活性:IC50标准值±5%(酶抑制试验)
色谱分析:
  • 保留时间:精度±0.1min(反相高效液相色谱)
  • 峰纯度:>99%(二极管阵列检测器)
  • 分离度:Rs≥1.5(离子交换色谱)

检测范围

1.血清样品:涵盖人血清与动物血清,重点检测白蛋白浓度、免疫球蛋白水平及脂蛋白污染,确保临床诊断准确性

2.重组蛋白:包括大肠杆菌和酵母表达系统,侧重纯度评估、分子量确认及生物活性验证,防止表达产物偏差

3.抗体药物:涉及单克隆与多克隆抗体,检测亲和力、聚集状态及片段化程度,确保治疗效力和安全性

4.酶制剂:聚焦工业与诊断用酶,重点测试比活性、热稳定性及底物特异性,优化催化性能和储存寿命

5.食品蛋白:覆盖乳制品与植物蛋白,检测营养含量、过敏原筛查及加工稳定性,保障食品安全和标签合规性

6.疫苗成分:包括病毒载体与重组抗原,侧重抗原含量、纯度分析及内毒素水平,防止免疫原性失效

7.细胞培养上清:涉及哺乳动物细胞系,重点定量分泌蛋白、杂质残留及细胞碎片,确保生物制品生产质量

8.组织匀浆:涵盖动物与植物组织,检测特定蛋白表达水平、降解产物及交叉污染,支持病理研究

9.诊断试剂盒:包含免疫层析与ELISA试剂,强调灵敏度校准、批次一致性及基质干扰,提升检测可靠性

10.工业酶产品:涉及洗涤剂与生物催化酶,侧重耐温性、催化效率及金属离子耐受性,优化工业应用效能

检测方法

国际标准:

  • ISO13903:2005氨基酸组成分析方法
  • ISO21572:2019食品蛋白质免疫学检测
  • USP<85>内毒素测试规范
  • IUPAC2.411凯氏定氮标准
  • AOAC999.03食品蛋白定量指南
国家标准:
  • GB/T22266-2008蛋白质含量测定方法
  • GB/T33419-2016抗体药物纯度分析
  • GB5009.5-2016食品中蛋白质检测
  • GB/T38165-2019酶活性测试规程
  • GB/T40367-2021重组蛋白结构表征
方法差异说明:ISO标准多采用高效液相色谱法,而GB标准倾向于紫外分光光度法,导致灵敏度差异(如检测限ISO为0.01μg/mL,GB为0.05μg/mL);在酶活性测试中,国际标准常用动力学常数计算,国家标准强调单位定义一致性;内毒素检测时,USP标准要求鲎试剂法,GB标准参考类似方法但验证参数不同

检测设备

1.紫外可见分光光度计:ThermoNanoDropOne(波长范围190-850nm,精度±0.001OD)

2.高效液相色谱仪:Agilent1260InfinityII(流速范围0.001-10mL/min,检测限0.01μg/mL)

3.质谱仪:ThermoOrbitrapFusion(分辨率>500,000,质量精度<1ppm)

4.圆二色光谱仪:JascoJ-1500(波长190-2500nm,温度控制±0.1°C)

5.表面等离子共振仪:BiacoreT200(检测限1RU,流速范围1-100μL/min)

6.电泳系统:Bio-RadMini-PROTEAN(电压10-300V,凝胶浓度4-20%)

7.酶标仪:BioTekSynergyH1(动态范围0-4OD,波长选择190-999nm)

8.离心机:Eppendorf5430R(最大转速30,000rpm,温度范围-10-40°C)

9.差示扫描量热仪:TAInstrumentsQ200(温度精度±0.01°C,加热速率0.1-100°C/min)

10.实时荧光定量PCR仪:AppliedBiosystems7500(温度范围4-99°C,动态范围10¹-10¹⁰拷贝)

11.超速离心机:BeckmanCoulterOptimaXPN(转速100,000rpm,最大离心力800,000xg)

12.冷冻干燥机:LabconcoFreeZone(冷凝温度-50°C,真空度<0.05mbar)

13.恒温振荡器:IKAKS130control(转速50-1500rpm,温度范围室温-60°C)

14.pH计:MettlerToledoSevenExcellence(精度±0.001pH,温度补偿自动)

15.显微镜:OlympusBX53(放大倍数40-1000x,分辨率0.2μm)

北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

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