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生物制剂检测

原创版权 关键字:生物制剂测试案例,生物制剂项目报价,生物制剂测试标准 相关: 发布时间: 2025-06-05 09:09:43

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因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

检测项目

理化性质检测:

  • 纯度分析:HPLC纯度(≥98%,参照USP<129>)、SEC检测聚集体(≤5%)
  • 分子量测定:质谱分子量偏差(±50Da)、等电点(pI值范围4.5-8.5)
  • 浓度测定:UV280吸光度法(精度±0.5%,BSA标准)
生物学活性检测:
  • 效力测试:IC50值(EC50标准曲线法)、结合活性(KD值≤10nM)
  • 细胞基检测:增殖抑制率(≥70%效价)、中和抗体滴度(log2转换)
杂质分析:
  • 宿主细胞蛋白残留:ELISA检测(≤100ppm,参照ICH Q6B)
  • DNA残留:qPCR定量(≤10ng/mg,检测限0.1pg/μL)
  • 内毒素:LAL法(≤0.5EU/mL,符合药典)
微生物学检测:
  • 无菌测试:膜过滤法(14天培养阴性)、生物负荷(≤10CFU/mL)
  • 支原体检测:PCR法(阴性对照)、真菌孢子计数
身份确认:
  • 序列验证:N端测序(一致性≥95%)、肽图分析(RP-HPLC匹配度)
  • 电荷异构体:cIEF检测(主峰≥80%)、糖基化位点
含量测定:
  • 蛋白质浓度:BCA法(线性范围0.5-20μg/mL)、Lowry法(变异系数≤5%)
稳定性测试:
  • 降解产物:强制降解试验(氧化片段≤3%)、热稳定性(Tm值≥60°C)
  • 储存条件:加速稳定性(25°C/60%RH,6个月)
免疫原性评估:
  • 抗药抗体:ELISA筛查(cut-off值设定)、中和抗体检测
功能性检测:
  • 受体结合:SPR分析(kon/koff速率)、Fc功能(ADCC活性≥50%)
  • 酶活性:动力学测定(Vmax/Km参数)
安全性检测:
  • 细胞毒性:MTT法(IC50≥100μM)、致瘤性测试(软琼脂克隆形成阴性)
  • 过敏原:组胺释放试验(≤10%释放)

检测范围

1. 单克隆抗体: 涵盖IgG1/IgG4亚型,检测重点为聚集体含量、电荷变异体及Fc功能活性,确保治疗效价。

2. 重组蛋白: 包括细胞因子和生长因子,侧重生物学活性、纯度及二硫键正确配对,防止降解产物。

3. 疫苗: 病毒载体和亚单位疫苗,重点检测抗原浓度、效力滴度及无菌性,保障免疫原性。

4. 细胞治疗产品: CAR-T和干细胞制品,强调细胞活力(≥90%)、身份标记及残留风险,如载体序列。

5. 基因治疗产品: AAV和质粒载体,检测重点包括载体滴度、转导效率及杂质DNA,确保安全性。

6. 血液制品: 血浆蛋白如凝血因子,侧重纯度、病毒灭活验证及稳定性,防止病原体污染。

7. 诊断试剂: ELISA试剂盒和抗体对,重点检测灵敏度、特异性及批间一致性,保证准确性。

8. 生物类似药: 参照原研产品,检测重点为结构相似性、活性对比及免疫原性,支持可比性研究。

9. 融合蛋白: 如Fc融合体,强调分子大小、结合域功能及热稳定性,优化药效。

10. 抗体药物偶联物: ADC产品,检测重点为药物抗体比、游离毒素及偶联效率,控制毒性风险。

检测方法

国际标准:

  • ICH Q6B 生物技术产品质量标准
  • USP<129> 蛋白质药物分析
  • EP 2.6.1 无菌测试方法
  • ISO 17025 检测实验室能力
  • ISO 11737-1 微生物计数
国家标准:
  • 中国药典 2020版 生物制品分册
  • GB/T 35890-2018 生物制品稳定性试验
  • GB/T 35428-2017 细胞治疗产品检测
  • GB/T 38165-2019 基因治疗载体滴度测定
  • GB/T 39729-2020 抗体药物杂质控制
方法差异说明:ICH Q6B与GB/T 38165在载体滴度测定上存在灵敏度差异(ICH要求检测限0.01vg/细胞,GB为0.1vg/细胞);无菌测试中,EP 2.6.1采用14天培养,而中国药典要求7-14天动态监测;宿主细胞蛋白残留检测,USP<129>推荐ELISA法,GB/T 39729-2020允许替代方法但需验证。

检测设备

1. 高效液相色谱仪: Agilent 1260 Infinity II(流速范围0.001-10mL/min,检测波长190-600nm)

2. 质谱仪: Thermo Q Exactive Plus(分辨率140000,质量精度<2ppm)

3. 酶标仪: BioTek Synergy H1(吸光范围200-1000nm,孔间差±1%)

4. 流式细胞仪: BD FACSCanto II(激光488nm/640nm,检测速度10000细胞/秒)

5. 实时荧光定量PCR仪: Roche LightCycler 480(温控精度±0.1°C,动态范围10^9)

6. 生物反应器: Sartorius BIOSTAT B-DCU(容积1-20L,DO控制±5%)

7. 超速离心机: Beckman Optima XE(转速100000rpm,g-force1000000g)

8. 毛细管电泳仪: SCIEX PA 800 Plus(电压范围0-30kV,检测灵敏度0.1μg/mL)

9. 表面等离子共振仪: Biacore T200(结合速率范围10^2-10^8 M-1s-1)

10. 细胞计数器: Countess II FL(检测范围1-10^6细胞/mL,荧光通道3个)

11. 稳定性试验箱: Memmert ICP800(温度范围-10°C-100°C,湿度控制10-95%RH)

12. 无菌隔离器: Getinge FlexiSafe(HEPA过滤效率99.99%,操作区ISO 5级)

13. 紫外可见分光光度计: Shimadzu UV-2600(波长范围190-1100nm,带宽1nm)

14. 冷冻干燥机: GEA Lyovapor(冷凝温度-80°C,真空度<0.01mbar)

15. 电化学发光仪: Meso Scale Discovery SJianCeOR(检测限0.01pg/mL,多通路分析)

北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

本文链接:https://www.yjser.com/huanjingjiance/20663.html

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